ژنهایtfrc و actb به عنوان ژن مرجع مناسب برای اندازه گیری بیان ژن فعال ساز پلاسمینوژن یوروکیناز (upa) در سرطان پستان

نویسندگان

رضوان اسمعیلی

مرکز تحقیقات سرطان پستان جهاددانشگاهی واحد علوم پزشکی تهران کیوان مجیدزاده اردبیلی

مرکز تحقیقات سرطان پستان جهاددانشگاهی واحد علوم پزشکی تهران نسرین عبدلی

مرکز تحقیقات سرطان پستان جهاددانشگاهی واحد علوم پزشکی تهران

چکیده

مقدمه: سرطان پستان شایعترین سرطان در میان زنان در سراسر جهان است. مدتهای طولانی محققان به دنبال یافتن راههایی برای تشخیص و درمان سرطان در مراحل اولیه بوده اند. تحقیقاتی که به منظور توسعه استفاده از نشانگرهای زیستی صورت گرفته اند در تشخیص و درمان سرطان پستان بسیار مؤثر بوده و منجر به کاربردی شدن برخی از این نشانگرها در نزد بیماران شده است. روش های جاری در اندازه گیری نشانگرهای زیستی مانند ایمونوهیستوشیمی، ایمونوسیتوشیمی و الایزا روش های مورد تأیید و تکرار پذیر در آزمایشگاههای مختلف هستند اما نتایج غیرکمی و مراحل کار متعدد و طولانی از نقاط ضعف این تکنیک ها است که محققان را به جستجو در مورد روشهای جایگزین مولکولی مانند (q-rt-pcr)quantitative real-time pcr تشویق می کند. تایید نهایی اعتبار این روش برای استفاده در آزمایشگاه های تشخیصی نیازمند اعتبارسنجی های متعدد از جمله در مورد ژن های خانه­دار (housekeeping genes) می­باشد.   روش بررسی: شش ژن خانه دار که به طور معمول در سرطان پستان استفاده شده است ( rplp0, hprt1, actb, gapdh , gusb , tfrc )، انتخاب و پایداری بیان آنها برای نرمال کردن بیان ژن upa ، مورد بررسی قرار گرفت . واکنش q-rt-pcr با استفاده از master mix 2x از شرکت primerdesign در واکنش های 20 میکرولیتری انجام شد. غلظت نهایی پرایمرها و پروب ها به ترتیب 5/0 میکرومولار و 3/0 میکرومولار بود. اندازه گیری میزان فلورسانت توسط دستگاه applied biosystems 7500 و آنالیز داده ها توسط نرم افزار 7500 software system ver.2.0 انجام شد. به منظور یافتن پایدارترین ژن خانه دار، داده ها ابتدا توسط نرم افزار excel به مقیاس خطی تبدیل شد. سپس داده ها توسط نرم افزار genorm [20] با روش pair wise comparison و با استفاده از نرم افزار normfinder [22] با روش combined estimate of the intra and inter group validation آنالیز شد.   یافته­ها: در این مطالعه rplp0 و gapdh بیشترین مقدار m و tfrc کمترین مقدار را داشت. (شکل 1) در این مطالعه tfrc بیشترین پایداری بیان را نشان داد. در این مطالعه میزان v برای استفاده از سه و چهار کنترل داخلی به ترتیب 5/0 و 4/0 بود.   نتیجه گیری: بر اساس این مطالعه ژن tfrc ،پایدارترین ژن کنترل و ترکیب tfrc و actb بهترین ترکیب دو ژنی برای نرمال سازی upa در سرطان پستان است. لازم به ذکر است که ژنهای rplp0 و gapdh به عنوان رفرانس مناسب توصیه نمی شود.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

ژنهایTFRC و ACTB به عنوان ژن مرجع مناسب برای اندازه گیری بیان ژن فعال‌ساز پلاسمینوژن یوروکیناز (uPA) در سرطان پستان

  مقدمه: سرطان پستان شایعترین سرطان در میان زنان در سراسر جهان است. مدتهای طولانی محققان به دنبال یافتن راههایی برای تشخیص و درمان سرطان در مراحل اولیه‌ بوده‌اند. تحقیقاتی که به منظور توسعه استفاده از نشانگرهای زیستی صورت گرفته‌اند در تشخیص و درمان سرطان پستان بسیار مؤثر بوده و منجر به کاربردی شدن برخی از این نشانگرها در نزد بیماران شده است. روش‌های جاری در اندازه‌گیری نشانگرهای زیستی مانند ایم...

متن کامل

اندازه گیری میزان بیان ژن mmp-۹ برای ارزیابی بهبودی بیماران مبتلا به سرطان پستان

مقدمه: ماتریکس متالو پروتئینازها-9 (mmp-9) آنزیمی با فعالیت پروتئازی است که تاکنون عملکرد آن در ایجاد چندین سرطان گزارش شده است. با توجه به رابطه مقدار فعال این آنزیم و سرطانی شدن سلول­ها در این مطالعه ما به بررسی میزان پلاسمایی این آنزیم در بهبود یا پیشرفت و متاستاز بیماری سرطان پستان پرداختیم. مواد و روش­ها: در این مطالعه میزان بیان mmp-9 در پلاسمای نمونه خون گرفته شده از 98 بیمار دارای سرطان...

متن کامل

کاهش بیان ژن BACH2 در نمونههای پارافینه بافت سرطان پستان به عنوان یک تنظیم کننده رونویسی در سرطان

مقدمه: سرطان پستان، یکی از دلایل اصلی مرگ‌و‌میر در زنان می­باشد. ژن BACH2 برای تنظیم تکوین و عملکرد انواع سلول­های ایمنی (سلول B، T و ماکروفاژ) نیاز می­باشد. ژن BACH2 یک لوکوس مستعد کننده غالب برای چندین بیماری خودایمن و آلرژی می­باشد، با این وجود بیان و عملکرد بالقوه BACH2 در سرطان پستان هنوز مشخص نشده است، لذا مطالعه حاضر با هدف بررسی بیان ژنی BACH2 در نمونه­های توموری پستان انجام شد. روش کا...

متن کامل

نقش بیان ژن یوبیکوئیتین D (UBD) در پیش‌آگهی سرطان پستان

Background: Breast cancer is the most common non- skin cancer among women and it’s the second leading cause of cancer related death in women. Ubiquitin and ubiquitin like proteins are member of signal transduction pathways which have several cellular functions. It has shown that Ubiquitin like protein D (UBD) has accelerated the cancer progress. The aims of this study is evaluation of UBD gene ...

متن کامل

اهمیت بالینی پلی‌مورفیسم ژن مهارکننده فعال کننده پلاسمینوژن-1 در مبتلایان سرطان پستان از شمال غرب ایران

Introduction: A common polymorphism 4G/5G in the promoter region of the Plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) gene has been reported to influence the expression levels of PAI-1. According to the evidence, progression of breast cancer can be associated with elevated levels of PAI-1, it seems that evaluation of a possible correlation between the polymorphism and clinical status of breast canc...

متن کامل

اندازه گیری بیان ژن گیرنده پروژستروندر بافت سرطانی و سالم پستان انسان به روش Real-time PCR

مقدمه: پیشرفت در ژنتیک مولکولی و عوامل تشخیص سرطان پستان در فهم بهتر زیست شناسی تغییر و تبدیل بافت سالم پستان به بافت سرطانی با خصوصیات تهاجمی و متاستاتیک کمک می کند. هدف این تحقیق به کارگیری روش قدرتمند Real-time PCR نسبی مبتنی بر سایبرگرین جهت اندازه گیری نسبی بیان ژن گیرنده پروژسترون A در انسان می باشد. روش کار: 10 نمونه بافت طبیعی و 20 نمونه بافت سرطانی پستان (درجه2) قبل از درمان و بدون آلو...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
بیماری های پستان

جلد ۳، شماره ۳، صفحات ۷-۱۵

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023